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2×Fast Pfu MasterMix图片
产品货号:
JN0043
中文名称:
2×Fast Pfu MasterMix
英文名称:
2×Fast Pfu PCR Master Mix
产品规格:
1ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu MasterMix专为扩增克隆DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3×10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu酶,2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间,非常适用于1~20kb长片段的扩增。




用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。


  • 高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的50倍。
  • 灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
  • 快速高效:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上,可在较短时间内获得高产量的PCR产物。
  • 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。



组分1mL
2×Fast Pfu MasterMix1mL
说明书1份

保存:-20℃


经检测无外源核酸酶残留;qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留;能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。


Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3'端"A"突出,除使用一步定向克隆试剂盒外,其它PCR产物的克隆方案有:
  • PCR前引物进行5'端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
  • 将产物3'末端加A后再与T载体连接。
  • 由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3'端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30mers。另外为了减少由3'→5'外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。



  • 需溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
  • 对高GC含量模板,建议将变性温度提高到98℃。
  • 对于高GC模板,建议配套使用PCR增强剂III或者添加终浓度为5%~8% DMSO。



  • 常用反应体系
    成分用量
    2×Fast Pfu MasterMix25μL
    上游引物0.2~1.0μM(终浓度)
    下游引物0.2~1.0μM(终浓度)
    模板(请根据实际使用
    模版进行选择,二选一即可)
    1~50ng(质粒)
    10ng~1μg(基因组)
    ddH2O至50μL
    注:Mg2+终浓度为2mM。
  • 推荐PCR反应程序
    • 当扩增片段<3K:
      循环数温度时间
      194℃90s
      3094℃20s
      50~60℃20s
      72℃1kb/30s
      172℃5min
      14℃保温

      当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
      循环数温度时间
      194℃5min
      3094℃5s
      68℃1kb/30s
      172℃5min
      14℃保温



50μL扩增体系中,λDNA为模板,扩增1kb~20kb片段。
2×Fast Pfu MasterMix
泳道M:λ/Hind III DNAMarker;
泳道1:1kb;泳道2:2kb;
泳道3:4kb;泳道4:6kb;
泳道5:8kb;泳道6:10kb;
泳道7:12kb;泳道8:20kb。


PCR MasterMix选购指南:
编号产品名称特点
适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列
JN00302×Taq PCR MasterMix高性价比PCR Mix,使用简便,扩增灵敏度高
JN00342×Complex Taq PCR MasterMixJN0030改进版,性能更均衡,适用面更广
JN00402×Fast Taq PCR MasterMix最快速的PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果
JN00352×RoomTop Taq PCR MasterMix可放在手边的PCR试剂,室温稳定存放60天
JN00362×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix室温稳定存放60天,高速PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果
适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆
JN00322×Taq Plus PCR MasterMix扩增效率更高及较好的保真度
JN00382×Hot Start Taq PCR MasterMix采用热启动Taq,可获得很好的特异性
JN00412×Ultra Taq PCR MasterMix高速扩增酶,优化配方,解决PCR扩增难题的,灵敏度高
高保真酶试剂,适用于长片段基因克隆
JN00312×Pfu PCR MasterMix采用高保真酶,适用于基因克隆
JN00432×Fast Pfu PCR MasterMix采用改良型高保真酶,更好的扩增效果,4倍扩增速度;扩增迅速
防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂
JN00472×PCR MasterMix(防污染)采用dUTP/UDG酶系统,从根本上杜绝PCR产物二次污染
JN00332×Genotyping PCR Kit(nomal)极高检测灵敏度,可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度


PCR MasterMix性能对比表:
名称编号扩增时间扩增长度是否有3'-A基因组扩增
2×Taq PCR MasterMixJN00301min/kb≤8kb+
2×RoomTop Taq PCR MasterMixJN00351min/kb≤8kb++
2×Complex Taq PCR MasterMixJN00341min/kb≤8kb+
2×Fast Taq PCR MasterMixJN004015s/kb≤8kb+
2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMixJN003615s/kb≤8kb++
2×Ultra Taq PCR MasterMixJN004115s/kb≤8kb+++
2×Taq Plus PCR MasterMixJN00321min/kb≤20kb++++
2×Ultra Taq Plus PCR MasterMixJN004215s/kb≤30kb++++
2×Hot Start Taq PCR MasterMixJN00381min/kb≤8kb++++
2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMixJN00391min/kb≤20kb++++
2×Pfu PCR MasterMixJN00311min/kb≤6kb×+
2×Fast Pfu PCR MasterMixJN004330min/kb≤12kb×+
2×SYBR Green Realtime PCR MasterMixJN00491min/kb≤8kb++
2×Genotyping PCR Kit(Normal)JN00331min/kb≤8kb+++++
2×Genotyping PCR Kit(Fast)JN004415s/kb≤8kb+++++
2×PCR MasterMix(防污染)JN00471min/kb≤8kb+

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